- · 关于大学外语四六级考试听力试听、带证参考及封闭教学楼的通知[12/07]
- · 关于转发《重庆市教育委员会关于公布2020年度高等教育课程思政项目立项名单的通知[12/07]
- · 雨僧讲坛:“相忘于江湖”——庄子哲学的现代解读[12/04]
- · 关于2020-2021学年选报《名著阅读》书目的通知[12/02]
- · 关于2020-2021学年度第1学期期末课程考试(含重修和赴美实习缓考)安排的通知[11/26]
- · 西南大学关于推荐首届全国中小学美育教学指导委员会委员人选的通知[11/24]
- · 雨僧讲坛:传统文化的学理建构[11/23]
- · 关于第十二届全国大学生数学竞赛(西南大学考点)安排的通知[11/23]
犬弓首蛔虫卵黄原蛋白DUF1943结构域的克隆及原核表达
作者: 罗永莉 朱宏宏 江艾耘 罗永芳 旷策嫣 周荣琼
关键词: 犬弓首蛔虫 DUF1943 克隆 原核表达
摘要:为克隆犬弓首蛔虫 Toxocara canis,T. canis卵黄原蛋白DUF1943结构域(The domain of unknown function 1943,DUF1943)(Tc-duf1943),构建其原核表达载体pET-28a(+)/duf1943,并检测重组蛋白在大肠杆菌 Esche-richia coli,E. coli中的表达形式.该文根据 T. canis的转录组数据,以 T. canis雌、雄虫cDNA为模板扩增 Tc-duf1943,然后与表达载体pET-28a(+)连接,转化 E. coli BL21(DE3),经IPTG诱导,对目的蛋白的原核表达形式和蛋白质纯化进行鉴定.结果显示 Tc-duf1943序列长度为864 bp,含有一个完整的开放阅读框,编码288个氨基酸;SDS-PAGE电泳结果表明,重组蛋白以包涵体形式存在,相对分子质量大小约为3.5×104;对表达条件进行优化后,以0.4 mmol/L IPTG,于37 ℃诱导4 h时可获得大量目的蛋白;利用Ni-NTA亲和层析柱纯化可以获得具有较高纯度的目的蛋白.该试验成功构建了pET-28a(+)/duf1943原核表达载体,为进一步研究 TcDUF1943的生物学功能奠定了基础.
上一篇: 重庆市主城区花境植物应用调查与分析
下一篇: 栽培因素影响甘蓝花蕾小孢子发育同步性研究